細胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs) 是一類膜表面糖蛋白,它們以配體-受體特異性結合的方式介導細胞與細胞間、細胞與細胞外基質間的相互接觸和結合并調節細胞功能,在胚胎發育和分化、正常組織結構的維持、炎癥反應、免疫應答、凝血和血栓形成、創傷修復、腫瘤浸潤與轉移等許多生理和病理過程中發揮重要的生物學作用。
實驗步驟:
1. 用10ug/ml的Fn預鋪96孔板,70ul/孔,4℃過夜后,PBS洗3遍
2. 再用1% BSA于37℃封閉1h,PBS洗3遍
3. 待測細胞培養至對數生長期,消化細胞,用無血清培養基懸浮細胞,用血球計數板計數,調整濃度為5*105/ml
4. 分別接種于預鋪Fn的96孔板中,每孔5000個細胞,每組設3個復孔。37 ℃孵育1 h后,PBS洗去未黏附的細胞
5. 5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS 洗3遍;0.1%的結晶紫染色,室溫靜止0.5 h,PBS洗3 遍
6. 每孔加入100μl 10%的乙酸,5~10 min后用酶標儀檢測595nm的吸光度值,用以表示黏附細胞的多少
7. 或者按照每孔加入100 ul甲醇,固定15min
8. 每孔加入100 ul吉姆薩染液,染色15min,PBS洗去染液
9. 倒置顯微鏡下隨機取5個隨機視野計數粘附細胞數量病拍照,統計結果
服務周期:
服務內容 |
說明 |
價格∕元 |
實驗周期 |
細胞粘附 |
建議3重復 |
1000元/板 |
5個工作日 |
溫馨提醒:
若用酶標儀計數為步驟1-6;若需要照片用步驟1-4,7-9