豬衣原體抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

                                                                     使用說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名：豬衣原體IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Chlamydia Psittaci (ELISA)

【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒

【預(yù)期用途】 豬衣原體病是由鸚鵡熱衣原體（Chlamydia Psittaci，CP）引起的一種慢性接觸性傳染病，臨床表現(xiàn)多樣化，病理變化也較為復(fù)雜。

  本試劑盒用于檢測豬血清中鸚鵡熱衣原體抗體，可作為感染豬的血清學(xué)診斷指標(biāo)。

【原    理】

本試劑盒系由預(yù)包被鸚鵡熱衣原體抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬鸚鵡熱衣原體抗體。實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有鸚鵡熱衣原體抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬鸚鵡熱衣原體抗體。

【試劑盒組成】 

【儲存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期為12個月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。

【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

【樣品準(zhǔn)備】

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

【檢驗方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物50μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。

【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照≤0.15，陽性對照≥0.5。

【檢驗結(jié)果的解釋】

1.C.O（臨界值）=2.1×陰性對照孔均值（陰性對照孔均值低于0.08時以0.08計算）。

2.樣品A值≥C.O為陽性；樣品A值＜C.O為陰性。

【試驗方法的局限性】

    該試驗僅作為定性檢測豬鸚鵡熱衣原體抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。

【注意事項】

1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶，使用時需恢復(fù)至室溫以完全溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8.不同批號試劑組分不得混用。

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱：上海酶聯(lián)生物科技有限公司

地    址： 上海市閔行區(qū)元江路5500號

電    話：4008-898-798  ，021-61725725  

傳    真：021-54795560

郵    編：200070              

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