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改良Harris蘇木素染色液

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摘要
屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,適用于細胞核染色,尤其適用于臨床紙片染色。

產(chǎn)品介紹
改良Harris蘇木素染色液

產(chǎn)品簡介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色,是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木? 精為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。

改良Harris蘇木素染色液是經(jīng)典的Harris蘇木素染色法的改進。該染色液不含汞,無毒,無氧化膜,細胞核染色質(zhì)著色深而細微,臨床上常替代Harris蘇木素染色液,染色時間一般5~8min。其特點是蘇木素被氧化的程度高,染色力強,雖然染色時間短,但是易使細胞核、細胞質(zhì)、纖維過染,染色后需要鹽酸乙醇分化,屬于退行性染色。

染色原理:
細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。

細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一 定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的
pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。

分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。
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