摘要
流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死
流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Propidium Iodide簡(jiǎn)稱PI,又稱碘化丙啶,對(duì)人體有刺激性。Hoechst33342能被活細(xì)胞攝取,與DNA結(jié)合,在紫外線下呈藍(lán)色熒光。PI使死細(xì)胞著色產(chǎn)生紅色熒光。在散點(diǎn)圖上結(jié)果為：正常細(xì)胞呈低藍(lán)/紅光,凋亡細(xì)胞呈高藍(lán)/低紅光,壞死細(xì)胞呈低藍(lán)/高紅光。
產(chǎn)品介紹
Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒(Hoechst 33342/PI Apoptotis Assay Kit)是一種采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙熒光染色方法進(jìn)行細(xì)胞周期與細(xì)胞壞死分析的檢測(cè)試劑盒。
單純的
PI染色能夠觀察DNA直方圖上凋亡細(xì)胞的亞G1峰，但只能代表G0/G1期發(fā)生凋亡，無法觀察S期和G2期發(fā)生的細(xì)胞凋亡，而且細(xì)胞經(jīng)過固定后無法對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分。
Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜，進(jìn)入正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞與DNA結(jié)合，能在紫外線下顯示藍(lán)色熒光，而且染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。PI不能穿透細(xì)胞膜，對(duì)于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對(duì)于壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性喪失，PI可以穿透細(xì)胞膜使壞死細(xì)胞著色產(chǎn)生紅色熒光。
Hoechst 33342/PI雙染后，可在流式細(xì)胞儀上將正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞區(qū)別開來。在二元直方圖上，正常細(xì)胞對(duì)Hoechst33342具有拒染性，呈弱藍(lán)色熒光＋弱紅色熒光(Hoechst 33342+/PI+)；凋亡細(xì)胞對(duì)Hoechst33342具有嗜染性
，
呈強(qiáng)藍(lán)色熒光
+弱紅色熒光(Hoechst 33342++/PI+)；壞死細(xì)胞對(duì)PI具有嗜染性，呈弱藍(lán)色熒光＋強(qiáng)紅色熒光。本試劑盒亦可用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察，檢測(cè)細(xì)胞含量范圍一般為0.1～1×10
6
之間。
