微量法:100管/96樣
注? ?意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去酰基化反應(yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
測(cè)定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無(wú)水乙醇。