分光光度法:50管/48樣
注?意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環(huán)中的酶,催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕帷幟仕岜旧聿灰籽趸陧槥躅^酸酶作用下,通過脫水與加水反應,使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進一步的氧化脫羧反應作準備。
測定原理:
ACO 催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將 NAD+ 還原生成 NADH,導致 340nm 處光吸收上升。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。