分光光度法:50管/48樣
注? ?意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動物、植物、微生物和細(xì)胞中,催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。
測定原理:
PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。