分光光度法:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
GST 是一種具有多種生理功能的蛋白質家族,主要存在于細胞質內。GST 是體內解毒酶系統的重要組成部分,主要催化各種化學物質及其代謝產物與 GSH 的巰基共價結合,使親電化合物變為親水物質,易于從膽汁或尿液中排泄,達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此,GST 在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發揮著重要的生物學功能。此外,因為 GST 具有 GSH-Px 活性,亦稱為 non-Se GSH-Px,具有修復氧化破壞的大分子如 DNA、蛋白質等的功能。注意,GST 催化的反應減少 GSH 含量,但是不增加GSSG 含量。
測定原理:
GST 催化 GSH 與 CDNB 結合,其結合產物的光吸收峰波長為 340nm;通過測定 340nm 波長處吸光度上升速率,即可計算出 GST 活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水。