分光光度法:50管/24樣
注?意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
GOGAT 廣泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構成 GS/GOGAT 循環,參與氨同化的調控。GOGAT 分為以 NADH 為還原劑的 NADH-GOGAT 和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT 主要存在于葉綠體基質中,與光合作用和光呼吸有關,主要同化NO3-還原和光呼吸產生的 NH4+。
測定原理:
Fd-GOGAT 催化谷氨酰胺的氨基轉移到 α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸,谷氨酸脫氫酶催化谷氨酸的脫氫反應,同時產生 NADH,使 WST-8 顯橙黃色,在 450 nm 下測定吸光值。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。