一、測定原理:
堿性條件下,蛋白將 Cu2+還原為 Cu+, Cu+與 BCA 試劑形成紫色的絡(luò)合物,562nm 處有最大吸收峰,依據(jù)吸光度與濃度成正比,通過測吸光度即可計(jì)算待測蛋白的濃度。
二、試劑組成及配制:
試劑一:粉劑×2 支,稀釋液,12.5ml×2 瓶,4℃冷藏密封保存 6 個(gè)月。
試劑一應(yīng)用液的配制:取試劑一粉劑 1 支與試劑一稀釋液 1 瓶混勻,溶解完全后 4℃待用。
試劑二:250μl×2 支,4℃冷藏密封保存 6 個(gè)月。
工作液的配制:按試劑一應(yīng)用液:試劑二=50∶1 的比例配制,混勻后待用,用多少配多少。
試劑三:終止劑貯備液 20ml×1 瓶,4℃冷藏密封保存 6 個(gè)月。終止劑應(yīng)用液:取終止劑貯備液用雙蒸水 5 倍稀釋后備用,4℃冷藏。
試劑四:524μg/ml 蛋白標(biāo)準(zhǔn)液 0.2ml×1 支。4℃保存 1 個(gè)月。
三、樣本前處理:
詳見試劑盒內(nèi)說明書關(guān)于樣本處理的說明。