β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒
一、測(cè)定原理:
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-Acetylglucosaminidase,NAG)廣泛存在于各種組織器官、體液、紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板中,是溶酶體中的一種酸性水解酶。底物在 NAG 作用下水解,釋放出游離的對(duì)硝基酚。加入堿性溶液停止反應(yīng),并使對(duì)硝基酚顯色。在400nm處測(cè)吸光度,可計(jì)算酶活力單位。
二、試劑組成及配制:
試劑一:溶液 40ml×1 瓶。
試劑二:底物,粉劑×1 支。
試劑三:終止劑 60ml×2 瓶。
試劑四:液體 6ml×1 瓶。(天冷會(huì)有結(jié)晶析出,測(cè)試前置于 37℃水浴直至透亮)
試劑五:3mmol/L 對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)貯備液 2ml×1 瓶。0.6mmol/L 對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的配制:3mmol/L 對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)貯備液作 5 倍稀釋,即3mmol/L 對(duì)硝基酚∶雙蒸水=1∶4 稀釋。底物緩沖液的配制:底物溶解度小,配制底物溶液時(shí),應(yīng)先用適量試劑一將試劑二粉劑 1支調(diào)成糊狀,再邊攪拌邊逐漸加試劑一到 30ml,混勻至完全溶解(不可加熱)。配好后的底物緩沖液為過飽和溶液,如有結(jié)晶,可靜置或離心后取上清進(jìn)行檢測(cè)。用不完的底物緩沖液 4℃可保存兩個(gè)月以上。