支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT)活性測定試劑盒
產(chǎn)品簡介:
支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT, E.C.2.6.1.42) 屬于以磷酸吡哆醛作為輔酶的Ⅳ類轉(zhuǎn)氨酶。該酶分布十分廣泛，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)廣泛存在于原核生物和大多數(shù)真核生物中。
支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT)催化特異 L-型氨基酸氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸，形成相應(yīng)的支鏈α-酮酸和谷氨酸；再用特異作用于谷氨酸的酶復(fù)合體分解谷氨酸，同時(shí)與顯色劑反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，該物質(zhì)在 450nm 處有大吸收峰，進(jìn)而得到支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT)的酶活性大小。
該酶催化反應(yīng)：
L-leucine+2-oxoglutarate=4-methyl-2-oxopentanoate + L-glutamate。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽和蒸餾水。
支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT)活性檢測:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取2個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液（10nmol/μL）。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1. nmol/μL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 依據(jù)顯色反應(yīng)階段，測定管的加樣表操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
