6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)試劑盒(WST-8法)微板法/96樣
產品簡介:
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH;EC 1.1.1.49)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是磷酸戊糖途徑的關鍵酶,同時維持 NADPH 在細胞內的水平, NADPH 反過來維持細胞中谷胱甘肽的水平進而保護細胞免受氧化損傷。因此 G6PDH 活性的高低可以從一定程度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH催化6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內酯,同時將NADP+還原為NADPH,傳統方法是檢測NADPH在340nm處的吸光值。由于NADPH的摩爾消光系數(ε)較低,所以這種方法靈敏度低,且嚴重受到干擾。
本試劑盒提供一種簡單,靈敏,快速的測定方法:該酶促過程產生的NADPH與特異的顯色劑反應,產生在450nm處有大吸收峰的有色物質,通過檢測該有色物質在450nm的增加速率,進而計算出G6PDH酶活性的大小。
[注]:粉劑量在mg級別,使用前用手甩幾次或者進行離心,打開直接加入要求的試劑即可。
所需的儀器和用品:
所需的儀器和用品:
酶標儀、96 孔板、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、研缽、冰。
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)活性測定:
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)活性測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗樣本和試劑浪費!
標準曲線制作過程:
1 制備標準品母液(1nmol/μL):向標準品 EP 管里面加入 0.6mL 蒸餾水(母液需在兩天內用且-20℃保存)。
2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. nmol/μL。也可根據實際樣本來調整標準品濃度。
3 依據加樣表操作,根據結果即可制作標準曲線。